Позначення олігонуклеотидами Біотин можна додати до будь-якого кінця послідовності ДНК під час полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) за допомогою біотинільованого праймера. Біотин також можна ферментативно включити під час ПЛР за допомогою біотину, позначеного dUTP. 15 листопада 2018 р.
Інші методи біотинілювання нуклеїнових кислот Фотоактивований біотин може бути випадковим чином включений у фрагмент ДНК дволанцюгової ДНК та одноланцюгової ДНК або РНК. Фотоактивований біотин просто додається до зразка та опромінюється ультрафіолетовим світлом.
Біотинілювання, також відоме як мічення біотином, є процесом ковалентно приєднуючи біотин(и) до біомолекул: такі як білки, антитіла, пептиди, олігонуклеотиди та інші макромолекули.
Розчиніть 10 мг біотину в 1 мл безводного ДМСО безпосередньо перед використанням. Додайте біотин, щоб отримати співвідношення 80 мкг на мг антитіла; негайно перемішати. (Див. примітки вище про використання різних молярних співвідношень біотину до антитіла). Оберніть трубочку фольгою; інкубуйте та обертайте при кімнатній температурі протягом 4 годин.
Більшість біотину в плазмі є вільним, розчиненим у водній фазі плазми. Однак невеликі суми є оборотно та ковалентно зв’язуються з білками плазми (приблизно 7 і 12% відповідно); зв’язування з сироватковим альбуміном людини, ймовірно, пояснює оборотне зв’язування.
Позначення олігонуклеотидами Біотин можна додати до будь-якого кінця послідовності ДНК під час полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) за допомогою з використанням біотинільованого праймера. Біотин також може бути включений ферментативно під час ПЛР за допомогою dUTP, міченого біотином.