Корисна фарба Ponceau S для визначення місцезнаходження та ідентифікації білків, які переносяться електрофоретично
/нейлонові мембрани перед опосередкованим антитілом виявленням оскільки барвник не заважає виявленню антитіл у вестерн-блотах.
Вестерн-блоти можуть завдати великої шкоди, але головною підмогою є фарбування понзо, яке допомагає вам побачити, чи відбувається послідовне перенесення білка на вашу мембрану. Таким чином, можливе пляма є швидким і оборотним
Деякі поширені білкові плями для мембран включають: Ponceau S, червона пляма, яка з часом тьмяніє; барвник кумасі, чутлива блакитна пляма, яка міцно зв’язується з білками та може заважати Вестерн-блоттингу; і Thermo Scientific MemCode4 Stain (Thermo Fisher Scientific), синя пляма, яка легко оборотна (Antharavally et …
Зауважте, що повне знебарвлення досягається лише на наступному етапі блокування фарбування Ponceau S не перешкоджатиме етапам блокування або зв’язування антитіл.
Ми завжди робимо Ponceau S перед блокуванням мембрани BSA або молоком який буде . Смуги тьмяніші, якщо ви робите це після насичення мембрани протеїном.
Чесно кажучи, робити Ponceau S навіть на зачищеній мембрані не дуже продуктивно. Якщо через 5-10 хвилин у вас немає сигналу ECL, можна приступати до наступної інкубації антитіл.